液相色谱柱的装柱方法

浏览： 5561| 更新时间：2016-08-04 |

　　液相色谱柱的一些要求

　　zui常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性填充剂，以十八烷基硅烷键合硅胶zui为常用，辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶（如氰基键合硅烷和氨基键合硅烷等）也有使用。正相色谱系统使用极性填充剂，常用的填充剂有硅胶等。离子交换色谱系统使用离子交换填充剂；分子排阻色谱系统使用凝胶或高分子多孔微球等填充剂；对映异构体的分离通常使用手性填充剂。

　　填充剂的性能（如载体的形状、粒径、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、含碳量和键合类型等）以及色谱柱的填充，直接影响供试品的保留行为和分离效果。孔径在15nm（1nm=10Å）以下的填料适合于分析分子量小于2000 的化合物，分子量大于2000 的化合物则应选择孔径在30nm 以上的填料。除另有规定外，分析柱的填充剂粒径一般在3μm~10μm 之间。粒径更小（约2μm）的填充剂常用于填装微径柱（内径约2mm），使用微径柱时，输液泵的性能、进样体积、检测池体积和系统的死体积等必须与之匹配；如有必要，色谱条件也需作适当的调整。当对其测定结果产生争议时，应以品种正文规定的色谱条件的测定结果为准。存放前除去杂质和盐，采用合适的存放溶剂，避免色谱柱床的干枯，避免机械振动，防止细菌生长，注意存放的温度。

　　液相色谱柱的装柱方法

　　1. 色谱柱应该是可以直接接在匀浆罐上的，如果不能，则需要一个转换接头。这个转换接头的尺寸很重要，既要能防止漏液，又要避免过硬或尺寸不合适而导致色谱柱接口螺纹的损坏；

　　2. 具体装柱过程一般来说是①先以合适的匀浆液（多为有机溶剂，刘国诠老师的《色谱柱技术》一书中列的比较全，可供参考）将填料充分分散（可以借助搅拌、超声等方式）；②在填料匀浆的过程中，完成准备工作，即把色谱柱接在匀浆罐的下端（色谱柱不接匀浆罐的一段要接好筛板和柱头，确保拧紧但不能拧死以免损坏色谱柱），打开匀浆罐上端和气泵之间的接头以便灌入匀浆液；③匀浆液罐好后，接好匀浆罐上端接头，开始加压；④选择合适的压力，就可以把填料压实了；⑤稳定在适当的压力上压一定时间后，卸掉压力，卸下色谱柱，把接匀浆罐这一段的填料抹平，装上筛板和柱头即可使用。

　　3. 装柱是个困难的过程，需要耐心摸索压力、匀浆液体积等参数，才能确保柱床均匀密实，达到*柱效和峰形。如果装的不好，则可能出现柱效不够，或拖尾等问题。
液相色谱柱的装柱方法一般情况下都是这样操作的，特殊情况请厂家或者代理商。

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