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色谱耗材常见问题(六)
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更新时间:2021-01-15
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1、色谱柱的温度极限,如60℃至240℃/260℃各表示什么?60℃—温度下限,低于该温度使用柱效会降低,但不会损伤色谱柱;240℃—恒温温度上限,可在此温度长时间使用;260℃—程序升温温度上限,不可超过此温度,且在此温度使用不得超过10分钟。
2、了解有关液相色谱柱的几个参数及安捷伦色谱柱的分类和应用范围表面积——颗粒外表面和内部孔表面的总和,以m2/gram表示;高表面积对于多组份样品的分离具有较强的保留能力,柱容量和分离度;表面积低的填料通常能迅速达到平衡状态,对于梯度淋洗尤为重要。孔径——颗粒的孔或腔的平均尺寸,范围60-10,000Å,大孔的填料颗粒可以延长溶质大分子在填料表面滞留的时间,达到充分分离,改善峰形;样品MW≤4000,选择80Å的孔径,样品MW>4000选择300Å的孔径。碳覆盖率——对色谱分离的影响,与基体物质相连的键合相的量。高碳覆盖率:提高分辨率,分析时间长;低碳覆盖率:缩短运行时间封端/封尾——对色谱分离的影响,使用较短烷烃链键合游离硅羟基(二次键合)封端:减轻待测组份与硅胶表面残留的酸性硅羟基反应而引起的色谱峰拖尾现象对于极性样品,未封端与经过封端处理的色谱柱在选择性上有明显差异粒径——1.8um3.5um→快速分离;5um→行业标准;7um→制备柱。
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